1、适用范围

适用于辣椒油、辣椒酱中苏丹红的检测。

2、提取步骤

将 0.500g 样品置于 15 mL 离心管，加入 5 ml 正己烷，涡旋充分混匀，超声 5min，取上清液，然后用 10 mL 正己烷洗涤残渣数次，至洗出无色为止，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至 5mL 以下，待净化。

3、 SPE 净化步骤净化

SPE 柱： 月旭 Welchrom^® SDD苏丹红专用柱（ 4 g/10 mL， 满足国标“装 3cm 的高度”）

a)活化：加入 5 mL 正己烷活化，流出液弃去；

b)上样：将提取液加入 Welchrom®苏丹红专用柱中，流出液弃去；

c)淋洗：用 15 mL 正己烷淋洗至无色液体流出，淋洗液弃去；

d)洗脱：用 50 mL 丙酮/正己烷（ 10/90）洗脱，收集洗脱液；

e)浓缩： 40 度水浴中旋转蒸发至干；

d)定容上机：用丙酮定容至 2.0 mL，过 0.45 µm PTFE 滤膜，上高效液相色谱

仪检测。

苏丹红标准溶液的配置： 分别称取苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ各 10 mg，用 3 mL 乙醚溶解后用丙酮定容至 250 mL。注意：此处如果采用国标方法用正己烷定容，进色谱分析会导致苏丹红色谱峰型不够理想，因为后续的液相方法是反相色谱法，流动相含有水，因而与正己烷不兼容。

4、色谱条件

色谱柱：月旭Ultimate XB-C18（4.6 x 250mm, 5μm）

流动相：乙腈/水=95/5

流速：1.0mL/min

进样量：20μL

柱温：30ºC

检测波长：500nm

5.色谱图或者加标回收率结果